一、昆明小鼠胰腺干细胞分离培养及特性鉴定（论文文献综述）
李凯新[1]（2019）在《牛磺酸对糖尿病大鼠胰腺干细胞增殖及诱导分化的研究》文中研究指明糖尿病已经被人们列为严重危害人类以及宠物健康的三大慢性病之一,其致死率仅次于癌症和心血管疾病。传统的治疗方法常会伴有机体耐药性和毒副作用等不良反应。研究发现病理状态下,胰腺干细胞能够增殖并定向分化为功能性的胰岛β细胞,分泌胰岛素。本试验通过制备I型糖尿病大鼠模型,检测牛磺酸对糖尿病的治疗作用,并从促进胰腺干细胞增殖分化的角度探讨其作用机制,为临床上糖尿病的治疗提供一定的参考。本论文研究内容包括体内及体外试验。体内试验:选用80只SPF级雄性大鼠,从中随机选取60只大鼠采取腹腔注射50 mg/kg链脲佐菌素（STZ）的方式进行1型糖尿病模型制备,7 d后检测大鼠的空腹血糖值,以空腹血糖值大于16.7 mmol/L判定为1型糖尿病模型制备成功。随后将大鼠随机分为五组:正常组（C）、牛磺酸对照组（T）、糖尿病模型组（M）、牛磺酸治疗组1（MT1）、牛磺酸治疗组2（MT2）,连续饲养8周,观察并记录大鼠行为变化,空腹血糖及体重的变化。大鼠处死前一周进行口服葡萄糖耐量试验,检测动物机体的糖负荷能力。试验结束后处死大鼠,检测大鼠血清中胰岛素（Insulin）、胰高血糖素（Glucagon）、C肽（C-peptide）含量。收集大鼠胰腺组织,石蜡切片HE染色观察胰岛的组织形态学变化,免疫荧光染色检测胰岛素及胰高血糖素阳性细胞表达情况。试验结果表明糖尿病大鼠持续给予牛磺酸进行治疗能够明显改善糖尿病三多一少的典型症状,并使血糖值显着下降。牛磺酸治疗组大鼠血清中胰岛素和C肽的含量较模型组显着升高,胰高血糖素的含量显着下降。免疫荧光染色结果显示牛磺酸治疗组与模型组相比,胰岛素的表达量明显升高,胰高血糖素表达量明显下降。口服葡萄糖耐量结果显示,牛磺酸治疗组大鼠糖负荷能力明显改善。体外试验:采用机械消化法分离培养糖尿病大鼠胰腺干细胞,Nestin免疫组化鉴定后,将细胞分为对照组（A组）和牛磺酸组（B组）,添加诱导分化培养基,诱导生成胰岛β细胞并进行DTZ染色鉴定。选取培养到第3代的细胞提取细胞总蛋白,Western-blot检测胰腺干细胞发育相关通路重要调控因子TLR4、RIP1、NF-κB P50、NF-κB P65的蛋白表达水平。试验结果表明,从糖尿病大鼠导管上皮提取出的干细胞经免疫细胞化学法鉴定确定为胰腺干细胞,添加诱导培养基经DTZ染色证明有胰岛β细胞的生成,Western blot检测胰腺干细胞增殖相关通路上关键蛋白TLR4、RIP1、NF-κB P50、NF-κB P65的表达均明显升高。综上,牛磺酸能够改善糖尿病大鼠典型临床症状,提高机体的糖负荷能力,促进胰岛素的分泌,并通过作用于NF-κB信号通路促进胰腺干细胞增殖并诱导分化。
张巨彪,苏秀兰,欧阳晓晖[2]（2015）在《新生大鼠胰腺干细胞的分离和培养及初步鉴定》文中指出目的探讨分离、培养及初步鉴定新生大鼠胰腺干细胞的方法。方法取30只无特定病原体（SPF）级新生大鼠的胰腺组织,用完整胰腺胶原酶消化法分离胰岛。以低糖改良Eagel培养液为基础培养液,于不同时期分别添加血清、碱性成纤维细胞生长因子、表皮细胞生长因子、胰岛素-转铁蛋白-硒添加剂、白血病抑制因子、神经干细胞原代培养的无血清培养液中的营养因子B27、神经元培养的无血清培养液中的营养因子N2等进行培养,倒置相差显微镜下观察其形态学特征及生长特性。应用免疫细胞化学法对培养不同时期的细胞进行巢蛋白（Nestin）及细胞角质蛋白19（CK-19）检测,并进行初步鉴定。结果 1新生大鼠胰腺内纤维组织少,体积小,完整胰腺胶原酶消化法简化了胰岛分离步骤,减少了污染机会,有利于进一步培养。2培养24 h可见细胞贴壁,但贴壁细胞数量较少,改用无血清培养后,贴壁细胞快速生长,1015 d形成单层细胞汇集,细胞形态较一致。3培养所得细胞一直较多表达胰腺干细胞的标志物Nestin,随培养时间延长,表达CK-19的细胞数量逐渐增多。结论新生大鼠胰腺消化后,获得的细胞于不同时期表达胰腺干细胞的标志物Nestin、CK-19。
吴芳春[3]（2014）在《牛胰腺间充质干细胞的分离培养及其生物学特性的研究》文中研究说明从20世纪末至今,在世界上掀起了一股干细胞研究热潮,干细胞因为具有的增殖与分化特性而受到越来越多的关注。随着干细胞的各种理论的日益完善以及相关技术的迅猛发展为传统的医疗带来了一场重大革命。干细胞作为具有自我更新能力以及全能性细胞,其特性与畜禽遗传资源的保存与利用互相结合原则相符,让其可以利用于动物资源的保存,开辟出一条畜禽遗传资源保护的一条新路。本实验以中国鲁西黄牛为材料,对牛胰腺间充质干细胞的体外分离培养体系进行了摸索；同时对其生物学特性的鉴定以及诱导分化潜能方面进行了研究。得出以下试验结果：1、建立了适合牛胰腺间充质干细胞体外分离培养的体系：1%Ⅳ型胶原酶在37℃消化组织样品30min进行原代分离,使用含有10%血清的L-DMEM培养基进行体外培养。2、建立了牛胰腺间充质干细胞系：该细胞系表达间充质干细胞表面分子标记,具有旺盛的增殖能力和多向分化潜能,体外培养传至P65代,培养时间超过240天,总计冻存203支。3、对牛胰腺间充质干细胞进行了形态学、表面分子标记的鉴定,均符合胰腺间充质干细胞特性。4、对体外培养的牛胰腺间充质干细胞进行了RT-PCR鉴定。结果表明,牛胰腺间充质干细胞对间充质干细胞标记物CD29、CD44、CD73、CD90、CD106,CD166以及胰腺干细胞标记物Vimentin,Nestin以及Insulin呈阳性表达,而对标记物血管内皮标记物CD34,CD45呈阴性表达。符合胰腺间充质干细胞的特性。5、将牛胰腺间充质干细胞在适宜的诱导条件下向成骨细胞、脂肪细胞两个方向进行了诱导,通过免疫学方法鉴定所诱导的细胞为目的细胞,验证了牛胰腺间充质干细胞的分化潜能。
邢小娟[4]（2013）在《成年大鼠类胰岛干细胞分离培养的研究》文中研究指明胰岛干细胞是一类存在于胎儿和成年胰岛内成体干细胞，具有自我更新和多分化潜能，其特点是在自然分化过程中分化形成胰岛组织的各种细胞。采用干细胞组织工程技术，体外分离克隆胰岛干细胞作为种子细胞，诱导其分化形成功能性胰岛细胞，并移植治疗糖尿病，是解决胰岛供体短缺的有效途径。本试验对成年大鼠类胰岛干细胞的分离培养、FBS和四种生长因子对成年大鼠类胰岛干细胞体外增殖的影响、成年大鼠类胰岛干细胞的主要生物学特性及其致瘤性等方面进行了较为系统的研究，初步揭示了胰岛干细胞体外生长增殖的规律，建立了胰岛干细胞体外培养体系，为利用胰岛干细胞技术生产具有医用价值的生物材料提供了参考依据。本研究主要内容包括：（1）成年大鼠类胰岛干细胞的分离培养本试验以成年大鼠胰腺组织为材料，采用机械剪碎结合0.1%Ⅳ型胶原酶消化分离胰腺组织，DTZ染色，挑取胰岛细胞团，以RPMI-1640+10%FBS+10mmol/LHEPES+71.5μmol/L β-巯基乙醇+1mmol/L丙酮酸钠为基础培养基进行培养，获得原代上皮样成年大鼠类胰岛干细胞及少量的成纤维细胞。在传代过程中，逐渐纯化成年大鼠类胰岛干细胞。成年大鼠胰岛干细胞生长至70%～80%融合时，形成铺路石样细胞单层。前3代类胰岛干细胞增殖较慢，通常培养7d进行传代；第4代以后类胰岛干细胞迅速扩增，生长3～4d就可对其传代。由第5代、第10代和第15代类胰岛干细胞生长曲线可知，细胞传代培养1d后就进入快速增殖期，1～4d处于对数生长期，5～6d处于平台期，7d后增殖能力开始下降。从成年大鼠类胰岛干细胞传代情况看，该干细胞有较好体外增殖能力，现已传至30代并冻存。染色体核型分析结果显示，第30代的成年大鼠类胰岛干细胞染色体的数量（2n=42）和形状均与第1代的相同。（2）FBS和四种生长因子对成年大鼠类胰岛干细胞体外增殖的影响以RPMI-1640+10mmol/L HEPES+71.5μmol/L β-巯基乙醇+1mmol/L丙酮酸钠为基础培养液，分别添加不同浓度的FBS、EGF、bFGF、KGF或IGF-Ⅱ，探讨血清和不同生长因子对成年大鼠类胰岛干细胞增殖影响。结果显示，当FBS浓度为15%时，成年大鼠类胰岛干细胞增殖速度最快；在RPMI-1640+15%FBS+10mmol/LHEPES+71.5μmol/L β-巯基乙醇+1mmol/L丙酮酸钠的基础上，再添加10ng/mLEGF、10ng/mL bFGF、5ng/mL IGF-Ⅱ或15ng/mL KGF，均更有助于成年大鼠类胰岛干细胞增殖，且细胞在添加10ng/mL bFGF的培养液中增殖速度最快。（3）成年大鼠类胰岛干细胞的主要生物学特性及其致瘤性随机取第15代成年大鼠类胰岛干细胞，进行细胞免疫荧光染色和流式细胞术检测。结果显示，第15代成年大鼠类胰岛细胞表达Ngn3、Nestin、Pax4、Pax6和Oct4，其阳性率分别为（90.6±3.2）%、（86.3±4.5）%、14.4%、7.7%和10.2%；不表达CK19、Somatostatin、CD15、Nanog、Sox2、CD117、Ptf1a、MafA和PCNA。取第26代类胰岛干细胞，以1×107个细胞/只（0.2mL）的量接种到4～6w裸鼠的腋窝背部皮下，SPF环境饲养30d，观察裸鼠的生长情况。结果显示，该成年大鼠类胰岛干细胞在裸鼠体内不具有明显致瘤性。
李军,孙毅,马荣,李勇[5]（2012）在《小鼠胰腺干细胞的分离、培养与鉴定》文中认为目的从新生小鼠中分离培养并鉴定胰腺干细胞。方法利用组织块法分离新生小鼠胰腺源性干细胞,经RPMI1640+5%胎牛血清+双抗+1 mmol/L丙酮酸钠+1 mmol/L非必需氨基酸+10 ng/mL表皮生长因子+10 ng/mL成纤维生长因子+2 mmol/L谷氨酰胺的溶液培养,利用免疫组化分析胰腺源性干细胞的兔抗巢蛋白抗体（Nestin）、胰肠同源域因子（PDX-1）和葡葡糖转运子（GLUT-2）抗原表达;经10 mmol/L尼克酰胺诱导产生胰岛样细胞团并利用双硫腙（DTZ）染色分析其胰岛素分泌情况。结果分离培养的胰腺源性干细胞呈Nestin、PDX-1和GLUT-2阳性;诱导的胰岛样细胞团呈DTZ染色阳性。结论分离获得的新生小鼠胰腺源性干细胞在体外可分化为类胰岛,并具有胰岛素分泌功能。
李云龙,郭欣,杨晓波,黄跃南[6]（2012）在《胎猪胰腺导管干细胞的体外分离、纯化、培养及鉴定》文中认为目的建立胎猪胰腺导管干细胞的体外分离、纯化、培养及鉴定的方法。方法采用胰酶和胶原酶Ⅳ、P消化法分离获得细胞,在含10%胎牛血清的M199培养基中行导管上皮细胞原代培养,而后将血清浓度提高到20%以上继续培养,3～4天后至每个小圆细胞形成一个集落;采用逆转录-多聚酶链反应（RT-PCR）的方法对获得的细胞检测CK19、Pdx-1、NeuroD/Beta2、insulin、Glut-2等基因的表达。结果成功分离获得胎猪胰腺导管细胞,并证实该细胞为胎猪导管源胰腺干细胞。经检测,细胞表达CK19,Pdx-1,Glut-2,NeuroD/Beta2等胰腺干细胞的标志,而insulin、Neurogenin3阴性表达。结论该方法可较好地分离纯化出胎猪胰腺导管细胞,经鉴定获得细胞具有胰腺干细胞的特性。
岑妍慧,何国珍,黄波,黄荣师,贾微,彭岳,玉光强[7]（2012）在《新生昆明小鼠胰腺干细胞体外分离、培养及自然分化的潜能》文中提出背景:关于胰腺干细胞在胰腺组织中的分布情况,以及如何有效的将其分离、体外优化培养,目前仍有一定的困难。目的:从新生昆明小鼠胰腺组织中分离出胰腺干细胞,在体外条件下培养观察其形态学和生物学特征,并进行初步鉴定。方法:取新生SPF级昆明小鼠的胰腺组织,使用Ⅴ型胶原酶消化,采用Percoll不连续密度梯度离心,使胰腺组织内、外分泌部细胞分离,分布在3个不同的密度界面;收集各界面的细胞,以无血清、添加碱性成纤维细胞生长因子和表皮细胞生长因子的DMEM培养基培养。结果与结论:通过细胞形态学和细胞生长特性的观察,结合双硫腙染色证实:采用Percoll不连续密度梯度离心,第一、二密度界面的细胞来源于胰腺内分泌部;第三密度界面细胞来源于胰腺外分泌部。分别从胰腺内、外分泌部获取胰腺组织细胞,在体外培养观察发现均存在一类大、圆、单个核的细胞,呈集落样附壁生长,具有较活跃的分裂增殖能力,碱性磷酸酶染色阳性,表达胰腺干细胞的特异性标志巢蛋白,即为胰腺干细胞;随着体外培养时间的延长,分别表达PDX-1和CK-19,呈现向胰腺内分泌部细胞和外分泌部细胞分化的趋势。
赵艳艳,庞长河,秦贵军[8]（2011）在《糖尿病小鼠胰腺干细胞转分化为胰岛样细胞》文中认为目的观察链脲佐菌素所致糖尿病小鼠胰腺干细胞是否能转分化为胰岛样细胞。方法以链脲佐菌素建立糖尿病小鼠模型,分离培养其胰腺导管上皮细胞,经体外扩增及诱导培养后,以细胞免疫化学方法检测PDX1表达,行STZ染色和葡萄糖刺激的胰岛素释放试验鉴定其功能。结果糖尿病小鼠胰腺干细胞经体外培养和诱导分化后,PDX1阳性,并形成胰岛样细胞团;胰岛样细胞对高糖刺激（15.0 mmol/L）的胰岛素释放较低糖（5.6 mmol/L）时增加了1.4倍（37.2±11.2比25.9±7.6,t=2.830,P<0.05）,DTZ染色阳性。结论链脲佐菌素所致糖尿病小鼠胰腺干细胞在体外培养条件下可转分化为胰岛素分泌细胞。
寇亚丽[9]（2011）在《体外诱导胰腺干细胞分化为胰岛样结构的初步探讨》文中研究说明目的:优化胰腺干细胞原位传代扩增培养方法和技术,建立并形成稳定的胰腺干细胞系,获得较大量胰腺干细胞并体外诱导分化为胰岛样结构。方法:优化原位传代扩增培养的方法对胰腺干细胞进行扩增,建立胰腺干细胞系。选择生长状态良好的的第二代胰腺干细胞分为四组:空白对照组、葡萄糖组、尼克酰胺组、血清尼克酰胺组,体外连续诱导培养4周,观察胰腺干细胞的形态学特征变化规律;以DTZ染色、Mallory染色对诱导后获得的胰岛样结构行进行初步鉴定;胰岛素抗体免疫荧光组织化学染色方法,检测所诱导的胰岛样结构中的胰岛素阳性细胞。结果:空白对照组:胰腺干细胞随着培养时间的延长,细胞形态及生长方式发生改变,由原来的圆形、立体感强变为扁平、折光性降低、立体感减弱;葡萄糖诱导组:诱导9天后,胰腺干细胞聚集,成串样生长,诱导20天后,细胞变扁平,未形成胰岛样结构;尼克酰胺诱导组:诱导5天后,胰腺干细胞逐渐靠拢,诱导25天后,胰腺干细胞形成椭圆形结构;血清尼克酰胺组:诱导1周后,胰腺干细胞逐渐靠拢,汇集成团,诱导2周后,汇集的细胞团增大,但未形成圆形或者椭圆形的结构,诱导3周后,细胞团逐渐形成有完整包膜包裹的胰岛样结构;胰岛样结构DTZ染色,呈棕红色;Mallory染色可见胰岛样结构中周围的细胞呈红色,中央的细胞呈淡黄色;收集胰岛样结构,制作石蜡切片后行Mallory染色,可见有橘黄色、红色两种细胞;胰岛素抗体免疫荧光组织化学染色,在紫外光线激发下,检测到呈绿色荧光的胰岛素阳性细胞。结论:（1）优化后的原位传代扩增培养方法,可扩增并建立胰腺干细胞系,获得较多数量的胰腺干细胞,满足后续实验的需要。（2）在血清尼克酰胺诱导条件下,胰腺干细胞可分化为有完整包膜包裹、DTZ染色阳性、Mallory染色可见两种细胞、胰岛素抗体免疫荧光组织化学染色检测到阳性细胞的胰岛样结构。
本刊中文部[10]（2011）在《本期专题:胰腺干细胞的分离培养与诱导分化》文中研究指明1小鼠胰腺千细胞在胎鼠成纤维细胞饲养层条件下的体外连续传代培养,见2009年13卷40期7964～7968页。2昆明小鼠胰腺干细胞分离培养及特异性标志物巢蛋白的鉴定,见2007年11卷7期
二、昆明小鼠胰腺干细胞分离培养及特性鉴定（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、昆明小鼠胰腺干细胞分离培养及特性鉴定（论文提纲范文）
（1）牛磺酸对糖尿病大鼠胰腺干细胞增殖及诱导分化的研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 第一章 文献综述 |
| 1.1 糖尿病概述及治疗现状 |
| 1.1.1 糖尿病及其诊断依据 |
| 1.1.2 糖尿病的并发症 |
| 1.1.3 糖尿病的治疗 |
| 1.2 治疗糖尿病药物的研发方向及展望 |
| 1.2.1 胰高血糖素分泌减少 |
| 1.2.2 胰岛素分泌增加 |
| 1.3 牛磺酸治疗糖尿病的研究进展 |
| 1.3.1 牛磺酸概述 |
| 1.3.2 牛磺酸的生物学功能 |
| 1.3.3 牛磺酸对不同类型糖尿病的降血糖作用 |
| 1.4 胰腺干细胞治疗糖尿病的研究进展 |
| 1.4.1 胚胎干细胞研究进展 |
| 1.4.2 成体干细胞研究进展 |
| 1.4.3 胰腺干细胞研究进展 |
| 1.5 本研究的目的及意义 |
| 第二章 糖尿病模型大鼠的制备及牛磺酸对1型糖尿病的治疗作用 |
| 2.1 试验材料 |
| 2.1.1 试验动物 |
| 2.1.2 主要试剂 |
| 2.1.3 主要仪器设备 |
| 2.2 试验方法 |
| 2.2.1 主要溶液配制 |
| 2.2.2 试验分组与处理 |
| 2.2.3 糖尿病模型制备 |
| 2.2.4 表观状态和行为变化 |
| 2.2.5 大鼠血糖检测 |
| 2.2.6 大鼠体重测量 |
| 2.2.7 口服葡萄糖耐量试验 |
| 2.2.8 血清生化指标的测定 |
| 2.2.9 胰腺石蜡切片制备 |
| 2.2.10 HE染色 |
| 2.2.11 免疫荧光染色检测胰岛中胰岛素、胰高血糖素的表达 |
| 2.3 结果与分析 |
| 2.3.1 大鼠糖尿病模型结果判定与分析 |
| 2.3.2 大鼠体重、血糖变化 |
| 2.3.3 口服葡萄糖耐量结果与分析 |
| 2.3.4 血清生化指标检测结果与分析 |
| 2.3.5 胰岛组织形态学变化 |
| 2.3.6 免疫荧光染色结果与分析 |
| 2.4 讨论 |
| 2.4.1 糖尿病大鼠模型的建立与判定 |
| 2.4.2 牛磺酸对糖尿病大鼠血清生化指标的影响 |
| 2.5 小结 |
| 第三章 牛磺酸对胰腺干细胞增殖分化的作用 |
| 3.1 试验材料 |
| 3.1.1 原代胰腺干细胞 |
| 3.1.2 试验试剂 |
| 3.1.3 主要仪器设备 |
| 3.2 试验方法 |
| 3.2.1 试验分组 |
| 3.2.2 主要溶液配制 |
| 3.2.3 胰腺干细胞的分离与纯化 |
| 3.2.4 细胞传代培养 |
| 3.2.5 Nestin免疫组化鉴定胰腺干细胞 |
| 3.2.6 细胞冻存 |
| 3.2.7 细胞诱导分化 |
| 3.2.8 DTZ染色鉴定类胰岛细胞团 |
| 3.2.9 Western Blot检测NF-κB通路关键蛋白的表达 |
| 3.3 结果与分析 |
| 3.3.1 胰腺干细胞标志物鉴定 |
| 3.3.2 胰腺干细胞形态变化 |
| 3.3.3 类胰岛细胞团鉴定 |
| 3.3.4 NF-κB信号通路关键蛋白的表达 |
| 3.4 讨论 |
| 3.4.1 胰腺干细胞的分离培养与鉴定 |
| 3.4.2 干细胞向β细胞的分化 |
| 3.4.3 牛磺酸促进胰腺干细胞增殖分化可能作用机制 |
| 3.5 小结 |
| 第四章 结论 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 攻读学位论文期间发表文章 |
（2）新生大鼠胰腺干细胞的分离和培养及初步鉴定（论文提纲范文）
| 1 材料与方法 |
| 2结果 |
| 3讨论 |
（3）牛胰腺间充质干细胞的分离培养及其生物学特性的研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 英文缩略表 |
| 第一章 综述 |
| 1.1 胰腺来源干细胞的研究进展 |
| 1.1.1 胰腺干细胞的概况 |
| 1.1.2 胰腺的发育 |
| 1.1.3 胰腺干细胞的分类 |
| 1.2 胰腺干细胞的国内外研究现状 |
| 1.2.1 国内外研究现状 |
| 1.2.2 目前存在的问题 |
| 1.3 我国动物遗传资源概况 |
| 1.4 目的和意义 |
| 第二章 牛胰腺间充质干细胞体外分离培养及特性研究 |
| 2.1 材料与方法 |
| 2.1.1 实验材料与试剂 |
| 2.1.2 实验方法 |
| 2.2 结果与分析 |
| 2.2.1 牛 PMSCs 的分离培养 |
| 2.2.2 牛 PMSCs 增殖能力检测 |
| 2.2.3 牛 PMSCs 特异性分子标记检测 |
| 2.2.4 牛 PMSCs 多向诱导分化 |
| 2.3 讨论 |
| 2.3.1 牛 PMSCs 组织来源 |
| 2.3.2 牛 PMSCs 分离方法 |
| 2.3.3 牛 PMSCs 体外培养 |
| 2.3.4 牛 PMSCs 标记性基因 |
| 2.3.5 牛 PMSCs 诱导分化 |
| 第三章 全文结论 |
| 3.1 牛 PMSC 体外分离培养、鉴定及生物学研究 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 作者简历 |
（4）成年大鼠类胰岛干细胞分离培养的研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 1 胰岛干细胞研究进展 |
| 1.1 胰岛的发育 |
| 1.2 胰岛干细胞的概念 |
| 1.3 胰岛干细胞的种类 |
| 1.3.1 巢蛋白（Nestin）阳性胰岛干细胞 |
| 1.3.2 胰岛内的间充质样干细胞 |
| 1.3.3 ghrelin 阳性细胞 |
| 1.4 胰岛干细胞的体外培养及鉴定 |
| 1.4.1 胰岛干细胞的分离及纯化 |
| 1.4.2 原代胰岛干细胞的培养 |
| 1.4.3 影响胰岛干细胞增殖的因素 |
| 1.4.4 胰岛干细胞的鉴定 |
| 1.5 胰岛干细胞的主要生物学特性 |
| 1.5.1 胰岛干细胞的形态学特征及生长特性 |
| 1.5.2 胰岛干细胞的主要相关标记因子 |
| 1.5.3 胰岛干细胞的分化特性 |
| 1.5.4 干细胞与癌干细胞 |
| 1.6 结语 |
| 2 成年大鼠类胰岛干细胞分离培养的研究 |
| 2.1 材料与方法 |
| 2.1.1 材料 |
| 2.1.2 方法 |
| 2.2 结果与分析 |
| 2.2.1 成年大鼠胰岛的分离 |
| 2.2.2 胰岛的纯化与培养 |
| 2.2.3 成年大鼠胰岛干细胞的生长行为 |
| 2.2.4 成年大鼠类胰岛干细胞的解冻活率检测 |
| 2.2.5 成年大鼠类胰岛干细胞的核型分析 |
| 2.3 讨论 |
| 2.3.1 消化分离胰腺组织的方法 |
| 2.3.2 胰岛的纯化方法 |
| 2.3.3 胰岛干细胞的纯化 |
| 2.3.4 类胰岛干细胞的培养 |
| 2.4 小结 |
| 3 FBS 和四种生长因子对成年大鼠类胰岛干细胞体外增殖的影响 |
| 3.1 材料与方法 |
| 3.1.1 材料 |
| 3.1.2 方法 |
| 3.2 结果与分析 |
| 3.2.1 FBS 浓度对成年大鼠类胰岛干细胞增殖的影响 |
| 3.2.2 EGF 浓度对成年大鼠类胰岛干细胞增殖的影响 |
| 3.2.3 bFGF 浓度对成年大鼠类胰岛干细胞增殖的影响 |
| 3.2.4 IGF-Ⅱ浓度对成年大鼠类胰岛干细胞增殖的影响 |
| 3.2.5 KGF 浓度对成年大鼠类胰岛干细胞增殖的影响 |
| 3.2.6 比较 EGF、bFGF、IGF-Ⅱ或 KGF 对成年类大鼠胰岛干细胞增殖的影响 |
| 3.3 讨论 |
| 3.3.1 胎牛血清（FBS）浓度对成年大鼠类胰岛干细胞增殖的影响 |
| 3.3.2 不同生长因子对成年大鼠类胰岛干细胞增殖的影响 |
| 3.4 小结 |
| 4 成年大鼠类胰岛干细胞的主要生物学特性及其致瘤性 |
| 4.1 材料与方法 |
| 4.1.1 材料 |
| 4.1.2 方法 |
| 4.2 结果与分析 |
| 4.2.1 成年大鼠类胰岛干细胞的表达特征 |
| 4.2.2 成年大鼠类胰岛干细胞体内成瘤试验结果 |
| 4.3 讨论 |
| 4.3.1 成年大鼠类胰岛干细胞的表达特征 |
| 4.3.2 成年大鼠类胰岛干细胞在裸鼠体内的成瘤试验 |
| 4.4 小结 |
| 5 结论 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 作者简介 |
| 导师简介 |
（5）小鼠胰腺干细胞的分离、培养与鉴定（论文提纲范文）
| 1 材料与方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 方法 |
| 1.2.1 组织块法分离小鼠PSCs |
| 1.2.2 小鼠PSCs的免疫组化鉴定 |
| 1.2.3 小鼠PSCs的诱导分化 |
| 2 结果 |
| 2.1 PSCs的分离与培养情况 |
| 2.2 PSCs的免疫组化鉴定结果 |
| 2.3 PSCs的诱导分化结果 |
| 3 讨论 |
| 3.1 小鼠PSCs分离与培养的可行性 |
| 3.2 小鼠PSCs免疫组化鉴定的意义 |
| 3.3 小鼠PSCs的诱导分化特点 |
（9）体外诱导胰腺干细胞分化为胰岛样结构的初步探讨（论文提纲范文）
| 英文缩略词 |
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 附图 |
| 参考文献 |
| 综述部分 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 |
| 攻读学位期间参加的学术会议 |
四、昆明小鼠胰腺干细胞分离培养及特性鉴定（论文参考文献）
- [1]牛磺酸对糖尿病大鼠胰腺干细胞增殖及诱导分化的研究[D]. 李凯新. 沈阳农业大学, 2019(02)
- [2]新生大鼠胰腺干细胞的分离和培养及初步鉴定[J]. 张巨彪,苏秀兰,欧阳晓晖. 医学综述, 2015(02)
- [3]牛胰腺间充质干细胞的分离培养及其生物学特性的研究[D]. 吴芳春. 中国农业科学院, 2014(03)
- [4]成年大鼠类胰岛干细胞分离培养的研究[D]. 邢小娟. 广东海洋大学, 2013(S1)
- [5]小鼠胰腺干细胞的分离、培养与鉴定[J]. 李军,孙毅,马荣,李勇. 山东医药, 2012(41)
- [6]胎猪胰腺导管干细胞的体外分离、纯化、培养及鉴定[J]. 李云龙,郭欣,杨晓波,黄跃南. 哈尔滨医科大学学报, 2012(03)
- [7]新生昆明小鼠胰腺干细胞体外分离、培养及自然分化的潜能[J]. 岑妍慧,何国珍,黄波,黄荣师,贾微,彭岳,玉光强. 中国组织工程研究, 2012(06)
- [8]糖尿病小鼠胰腺干细胞转分化为胰岛样细胞[J]. 赵艳艳,庞长河,秦贵军. 中华实验外科杂志, 2011(10)
- [9]体外诱导胰腺干细胞分化为胰岛样结构的初步探讨[D]. 寇亚丽. 广西医科大学, 2011(08)
- [10]本期专题:胰腺干细胞的分离培养与诱导分化[J]. 本刊中文部. 中国组织工程研究与临床康复, 2011(10)