一、植物冻害和氧化胁迫——甘蓝叶冻-融循环中超氧的产生（论文文献综述）
曹冰,龙翔宇,肖小虎,唐朝荣[1]（2014）在《巴西橡胶树中2个NADP-苹果酸酶基因的克隆和表达特性分析》文中提出从橡胶树中克隆2个NADP-ME（苹果酸酶）基因的全长cDNA,分别命名为HbNADP-ME1和HbNADP-ME2。HbNADP-ME1和HbNADP-ME2 cDNA全长分别为2 428、2 139 bp,分别编码643、593个氨基酸组成的蛋白,二者的氨基酸序列一致性高达87.25%,且分别与蓖麻和杨树的一个NADP-ME序列具有较高的序列一致性。2个HbNADP-ME蛋白都含有典型的植物NADP-ME蛋白的保守结构域,均富含亮氨酸（Leu）,同属于非分泌型稳定蛋白。2个HbNADP-ME基因在橡胶树不同组织中的表达存在明显差异,在根中的表达量最高,种子和花中的表达量次之;另外,HbNADP-ME1基因在胶乳中受机械伤害有下调表达趋势,HbNADP-ME2基因在胶乳中受割胶处理也表现出下调表达趋势,而低温胁迫则显着诱导2个基因在叶片和根中的表达。结果说明,HbNADP-ME基因可能参与橡胶树的抗逆应答及代谢调控（包括胶乳代谢调控）。此结果为深入揭示橡胶树中NADP-ME基因的功能奠定了基础。
陈超[2]（2014）在《低温条件下冬小麦糖代谢和抗氧化活性与耐寒性关系》文中提出黑龙江属于高寒地区,冬季温度低且持续时间长,最低可以至-40℃左右。冬小麦在黑龙江省稳定的安全越冬一直是冬小麦育种上的重要问题。因此,研究冬小麦低温处理下,随低温的持续其生理生化变化特性,对冬小麦育种具有重大意义。本试验以抗寒性不同的两个冬小麦品种为材料进行田间和实验室试验,研究低温胁迫下,冬小麦分蘖节和叶片的生理特性,从而为寒地冬小麦的抗寒育种提供理论依据。本试验主要研究结果如下：1.低温处理下,抗寒品种东农冬麦1号的存活率高于冷敏感品种济麦22的存活率,东农冬麦1号最高达到100%,济麦22最高达到33%。-12℃3d对东农冬麦1号存活率基本没有影响,从-18℃1d开始其存活率开始低于40%,-24℃时存活率不超过10%。-12℃即对济麦22的存活率产生了很大的影响,-18℃时存活率为零。2.低温处理下,相对电导率随着温度的降低和处理时间的持续,整体上呈上升的趋势。同一条件下,东农冬麦1号的相对电导率低于济麦22的相对电导率。3.低温处理下,冬小麦体内活性氧产生速率随着低温的降低和处理时间的持续,呈上升趋势。抗寒品种活性氧产生速率变化范围在0.2-0.63nmol-g-1FW·min-1,不抗寒品种则为0.4421-1.241nmol·g-1FW·min-1,同一条件下,东农冬麦1号体内的活性氧产生速率低于济麦22体内的活性氧产生速率。过氧化氢（H202）比较分析得出,冷冻条件下东农冬麦1号过氧化氢含量显着低于济麦22,-12℃3d和-18℃3d,东农冬麦1号的过氧化氢含量分别为5.21μmol·g-1FW和5.73μmol·g-1FW,而济麦22的过氧化氢含量分别为6.62μmol·g-1FW和7.02μmol·g-1FW。4.低温处理下保护酶活性变化表现为,东农冬麦1号和济麦22的SOD和POD活性均呈先升后降的趋势,在冷胁迫后期略微下降。-18℃3d处理下东农冬麦1号的SOD活性为123.04U·g-1,而济麦22仅为54.77U·g-1,可以很好地区分品种的抗寒性。东农冬麦1号CAT活性呈上升趋势,济麦22CAT活性呈降-升-降的趋势,本研究中仅在-18℃3d东农冬麦1号的CAT活性与济麦22有显着差异,此时东农冬麦1号为50.47U·g-1FW-min-1,而济麦22为30.42U·g-1FW-min-1。5.非酶抗氧化物质变化表现为,低温驯化20d后,东农冬麦1号的还原性抗坏血酸（ASA）含量显着高于济麦22,且东农冬麦1号的ASA含量在-12℃3d时达到峰值,为4564.14μg·g-1FW,而济麦22在驯化30d ASA含量达到最高为1477.59μg·g-1FW,到-18℃3d东农冬麦1号的ASA含量为3935.67μg·g-1FW,而济麦22仅为783μg·g-1FW。两个冬小麦品种总ASA含量以及脱氢型抗坏血酸含量的变化趋势与还原性抗坏血酸ASA变化趋势一致,低温下抗寒品种非酶抗氧化物质保持较高的含量,能够有效地清除活性氧来保持较高的抗寒性。6.低温处理下糖分含量变化表现为,两冬小麦品种分蘖节的可溶性糖含量逐渐升高,最高值出现在驯化30d时,此时东农冬麦1号与济麦22分蘖节的可溶性总糖含量分别为255.22和173.95mg·g-1。温度继续下降时,可溶性糖含量下降,但东农冬麦1号分蘖节的可溶性糖含量在下降后再次上升,分蘖节中的可溶性总糖在-18℃3d作用下从182.49mg·g-1升至251.48mg·g-1,而济麦22分蘖节中可溶性糖含量则从-12℃3d时123.63mg·g-1降至-18℃3d时81.12mg·g-1,且东农冬麦1号各器官可溶性糖含量一直高于济麦22；两个品种蔗糖含量均在驯化30d达到最高值,分蘖节中的蔗糖含量高于叶片中蔗糖含量,所有低温处理下东农冬麦1号叶片和分蘖节中蔗糖含量均显着高于济麦22；东农冬麦1号果糖含量呈逐渐升高的趋势,在-18℃3d下其分蘖节的果糖含量达到峰值为98.143mg·g-1,而济麦22分蘖节中果糖含量仅在低温驯化30d达到峰值为40.793mg·g-1,在-18℃3d时济麦22分蘖节中果糖含量仅为19.283mg·g-1。两个品种叶片中果糖含量均在驯化30d达到峰值,但此时二者果糖含量差异不显着,-18℃3d下,东农冬麦1号果糖含量为58.033mg·g-1,显着高于济麦226.063mg·g-1。7.低温处理下呼吸代谢相关酶活性变化表现为,低温驯化阶段及-12℃3d济麦22分蘖节的丙酮酸激酶活性要显着高于东农冬麦1号,只有在-18℃3d下显着低于东农冬麦1号；而低温处理下与呼吸有关的己糖激酶则表现为抗寒品种显着高于不抗寒品种。
回彦哲[3]（2013）在《两种连翘的抗寒性分析》文中研究说明本文以3a生美国金钟连翘（Forsythia×intermedia zabel）和连翘（Forsythiasuspensa Vahl）枝条和花瓣为试材。研究其在保定地区的抗寒性，测定了过冷却点、自然越冬过程中以及低温处理后的电解质渗出率、超氧化物歧化酶（SOD）活性、过氧化物酶（POD）活性、MDA含量、可溶性蛋白含量等指标，主要研究结果如下：（1）无论是人工低温胁迫，还是自然越冬过程中，连翘枝条的相对电导率均高于美国金钟连翘，电导率与温度变化呈负相关。（2）人工低温胁迫的条件下，结合Logistic方程，对两种连翘枝条梢部、中部和基部的电导率进行拟合得到其半致死温度分别为：华北连翘枝条梢部-14.13℃、华北连翘枝条中部-16.51℃、华北连翘枝条基部-17.59℃、美国连翘枝条梢部-14.26℃、美国连翘枝条中部-17.12℃、美国连翘枝条基部-18.78℃。（3）可溶性蛋白的含量与植物的抗寒性正相关。人工低温胁迫和自然越冬过程中，可溶性蛋白含量均呈先上升后下降的变化趋势。人工低温胁迫条件下，美国金钟连翘的可溶性蛋白含量高于连翘，而自然越冬过程中，连翘枝条中可溶性蛋白含量高于美国金钟连翘。（4）丙二醛（MDA）含量与植物的抗寒性负相关。人工低温胁迫条件下，丙二醛（MDA）含量呈持续上升的变化趋势，而在自然越冬过程中，丙二醛（MDA）含量呈现先上升后下降的趋势。无论是人工低温胁迫还是自然越冬过程，美国金钟连翘枝条中丙二醛（MDA）的含量均低于连翘。（5）两种连翘的SOD活性变化在人工低温胁迫和自然越冬过程中均呈先升高后降低的趋势。而POD活性在自然降温过程中表现出了明显的“双峰”趋势。（6）两种连翘花瓣不同花期的过冷却点温度差异显着，同一种连翘盛花期过冷却点温度最高，初花期其次，蕾期最低。两种连翘相比，蕾期和初花期连翘花瓣的过冷却点较低，而盛花期，美国金钟连翘花瓣的过冷却点较低。（7）随着处理温度的降低，两种连翘花瓣中可溶性蛋白和丙二醛含量呈现持续升高的趋势，SOD和POD活性呈现先升高后降低的趋势。美国金钟连翘可溶性蛋白含量较高，SOD、POD活性的峰值出现较早，两种连翘的丙二醛含量差异不明显。
刘凯[4]（2012）在《拟南芥CBF1基因转化香蕉及其抗寒性研究》文中指出香蕉（Musa SPP.）是重要的热带水果之一,也是世界上继水稻、小麦和玉米之后的第四大粮食作物。在我国华南地区,种植香蕉已成为农民的主要经济来源,在热区经济和农村社会发展中发挥着越来越重要的作用。香蕉对低温非常敏感,周期性的寒害给我国香蕉产业造成了巨大的经济损失。培育抗寒品种是解决香蕉寒害的重要途径。香蕉的主栽品种大多为三倍体,难以通过传统育种方式培育抗寒品种,而转基因技术为培育抗寒品种提供了很好的途径。拟南芥CBF1是COR（cold regulated）冷应答基因的转录激活因子,其发现为基因工程改良植物抗逆性提供了一条重要的途径。该类转录因子能与下游COR基因启动子上的核心元件CRT/DRE特异结合,促进下游一系列基因的表达,激活植物体内的多种耐逆性机制,从而提高转基因植株耐低温、干早和高盐等非生物胁迫的能力。在此基础之上,很多学者进行了拟南芥CBF1（AtCBF1）基因转化各种植物的研究,并取得了理想的抗寒效果。本研究利用农杆菌介导,转化由花椰菜花叶病毒35S启动子启动的AtCBF1基因到东莞大蕉（Musa spp.ABB group）和夫人指蕉（Musa spp.AA group）的胚性悬浮细胞（ECS）中,经体细胞再生途径,成功获得转基因植株。并对转基因植株的抗寒性进行了检测。构建了转基因大蕉的SSH-cDNA文库,以筛选与抗寒性相关的内源基因。这些研究结果对香蕉的抗寒育种具有重要的理论和实际意义。本研究获得的主要研究结果如下：1.根据GenBank中公布的AtCBFl基因cDNA全序列,设计特异引物从野生型拟南芥中扩增出目的基因的全序列,经比对与CBF1基因（NM118681）的同源性为100%。利用质粒PBI121及pCAMBIA1301构建其植物表达载体p1301-CBF1并转化农杆菌菌株EHA105,制备工程菌以转化香蕉。2.以大蕉（Musa spp.ABB group）和夫人指蕉（Musa spp.AA group）的未成熟雄花为外植体,诱导愈伤组织和胚性愈伤组织,对胚性愈伤组织进行液体培养成功地诱导出了这两个品种的ECSs。然后,建立了ECSs途径的再生体系。3.利用农杆菌EHA105介导大蕉（Musa spp.ABB group）和夫人指蕉（Musa spp.AA group）的ECSs,侵染和共培养之后,在含有5mg/L潮霉素（Hyg）和400mg/L头孢菌素（Cef）的MS培养基中进行体胚筛选和萌发。萌发的抗性胚生根后,获得的抗性植株。4.经GUS组织化学染色和PCR扩增检测,获得了大蕉6个转基因株系,共53株,10个株系的转基因夫人指蕉,共102株,证明了AtCBF1基因已整合至香蕉的基因组内。形态学观察发现,转基因大蕉和夫人指蕉植株均表现出矮化、叶片增厚及叶色深绿等表型。5.利用RT-PCR和qRT-PCR对外源基因AtCBF1的表达进行定性和定量检测,结果验证了AtCBF1基因在转基因大蕉和夫人指蕉中均获得了表达,同时qRT-PCR的结果表明,AtCBF1基因的表达水平在各转基因株系中存在差异。6.在7℃低温下处理5天,对2个转基因大蕉株系（T1和T3）和2个转基因夫人指蕉株系（L1和L4）进行抗寒性相关的生理生化指标测定。结果显示,转基因大蕉和夫人指蕉的离子渗漏率、丙二醛（MDA）含量均要低于对照植株；而转基因大蕉的SOD活性高于对照植株,脯氨酸含量、可溶性糖含量和叶片的相对含水量在转基因大蕉和夫人指蕉中均高于对照植株。7.各20株转基因大蕉和夫人指蕉置于4℃低温分别处理5天和3天后,观察其冷害症状。转基因大蕉没有出现冷害症状,而对照已出现了萎焉脱水症状,但均没有发现冷害致死现象。转基因夫人指蕉低温处理后叶片稍微卷曲,但没有表现出冷害症状,而对照植株出现严重脱水,25℃恢复生长3天后,高达90%对照植株死亡,而转基因植株无死亡的现象。这些结果直观显示,过量表达AtCBF1基因的转基因大蕉和夫人指蕉的抗寒性均获得了提高。8.本研究构建了转基因大蕉的SSH-cDNA文库,从文库中筛选到了Clp基因和乌头酸水合酶基因,这两个基因均与抗逆性有关。利用qRT-PCR对Clp基因的表达进行验证发现,Clp基因在转基因植株内表现上调。因此推测,AtCBF1蛋白可能调控了内源基因Clp和乌头酸水合酶基因等的表达,提高了转基因植株的抗寒性,需要进一步的验证。
杨凤翔[5]（2010）在《不同草莓品种抗寒性的综合评价》文中认为本试验以‘埃尔桑塔’、‘草莓王子’、‘大将军’、‘鬼怒甘’、‘红瑞光’、‘玛丽亚’、‘欧宝’、‘全明星’和‘香绯’共9个草莓品种作为试验材料。于秋冬季自然降温时取各品种叶片,测定其半致死温度（LT50）和质膜透性（PMP）、绝对含水量（AWC）、相对水量（RWC）、叶绿素（Chla+b）含量、可溶性糖（WSS）含量、可溶性蛋白质（WSP）含量、脯氨酸（Pro）含量、丙二醛（MDA）含量、超氧化物歧化酶（SOD）活性和过氧化物酶（POD）活性等生理生化指标,利用主成分分析和聚类分析对不同草莓品种的生理生化指标变化率进行综合评价分析。结果表明：1. 9个草莓品种的LT5o经测定,抗寒性强的草莓品种‘全明星’LTso可达-31.27℃,而不抗寒的品种‘埃尔桑塔’LT50只为-14.36℃,其它品种的LTso居于其间。2.自然降温过程中,9个草莓品种的叶片AWC和RWC均呈下降趋势,叶片失水量与品种间的抗寒性强弱呈负相关；同时低温导致叶片膜系统受损,PMP和MDA含量逐渐上升,Chla+b含量降低,Chlb比Chla受破坏更严重,导致Chla/b上升；同时伴随着温度的下降,渗透调节物质WSS含量,WSP含量和Pro含量逐渐上升,用于防止失水或对膜及蛋白起保护作用；低温导致草莓叶片活性氧（ROS）代谢失衡,保护性酶在一定程度上参与了多余ROS的清除,但可能由于ROS已经超出SOD和POD的清除能力,并且对质膜产生了破坏作用,从而影响了SOD和POD活性,使得SOD活性呈逐渐下降的趋势,POD活性则呈先上升后下降的趋势。3.主成分分析综合评价排序与半致死温度排序结果基本一致；聚类分析将9个品种的抗寒性分为三类,其中‘全明星’和‘香绯’属于强抗寒品种,‘草莓王子’、‘大将军’、‘红瑞光’和‘欧宝’属于中抗寒品种,而‘埃尔桑塔’、‘玛丽亚’和‘鬼怒甘’属于弱抗寒品种。主成分分析和聚类分析的结果与田间所观察结果基本一致。多元统计分析方法在植物抗寒性的综合评价分析中具有重要的意义。
靳月华,陶大立,杜英君[6]（2002）在《植物冻害和氧化胁迫——甘蓝叶冻-融循环中超氧的产生》文中提出为检验植物冻害的发生和氧化胁迫这一假说 ,在冰冻前把氮蓝四唑 （NBT）真空渗入到甘蓝叶圆片中 .在叶圆片冻 融循环中NBT被还原为甲 .把其中的单甲 用乙醇提取出来 ,在分光光度计上比色 ,可作为冻 融循环中产生的氧化胁迫的定量指标 .NBT本身作为氧化剂 ,使冻害稍有增加 .作为冰冻保护剂的二甲基亚砜真空渗入叶圆片使其抗冻性显着增加 ,而NBT还原则显着减少 ,表明二甲基亚砜在保护叶组织免受冻害上的作用和它减缓植物组织氧化胁迫的作用有关 .实验结果支持植物冻害的发生和氧化胁迫有关这一假说 .实验还表明还原NBT的还原剂很可能是超氧阴离子自由基 .
二、植物冻害和氧化胁迫——甘蓝叶冻-融循环中超氧的产生（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、植物冻害和氧化胁迫——甘蓝叶冻-融循环中超氧的产生（论文提纲范文）
（1）巴西橡胶树中2个NADP-苹果酸酶基因的克隆和表达特性分析（论文提纲范文）
| 1 材料与方法 |
| 1.1 植物材料 |
| 1.2 菌株与试剂 |
| 1.3 方法 |
| 1.3.1 材料处理 |
| 1.3.2 总RNA提取与c DNA第一链合成 |
| 1.3.3 巴西橡胶树NADP-ME基因全长c DNA克隆 |
| 1.3.4 生物信息学分析 |
| 1.3.5 实时荧光定量PCR分析(q RT-PCR) |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 Hb NADP-ME基因的克隆及序列分析 |
| 2.2 系统进化分析 |
| 2.3 Hb NADP-ME在不同组织和叶片不同发育时期的表达分析 |
| 2.4 Hb NADP-ME基因在不同胁迫条件下的表达模式分析 |
| 3 讨论与结论 |
（2）低温条件下冬小麦糖代谢和抗氧化活性与耐寒性关系（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 1 前言 |
| 1.1 低温对植物的伤害机理 |
| 1.1.1 低温对植物的伤害 |
| 1.1.2 低温对植物伤害的原因 |
| 1.2 低温对冬小麦生产的影响 |
| 1.3 冷驯化对植物抗寒性的影响 |
| 1.4 生理代谢与植物抗寒性的关系 |
| 1.4.1 活性氧与植物抗寒性的关系 |
| 1.4.2 抗氧化系统与植物抗寒性的关系 |
| 1.4.3 糖积累与植物抗寒性的关系 |
| 1.4.4 糖酵解与植物抗寒性的关系 |
| 1.5 我国寒地冬小麦研究进展 |
| 1.6 东农冬麦1号的特性和研究进展 |
| 1.7 本试验研究内容 |
| 1.7.1 低温条件下冬小麦存活率和相对电导率的调查 |
| 1.7.2 低温条件下冬小麦品种间生理基础的比较 |
| 1.8 研究目的及意义 |
| 2 材料与方法 |
| 2.1 试验材料与处理方法 |
| 2.1.1 试验材料 |
| 2.1.2 室内模拟低温设计及取材 |
| 2.2 试验药品及仪器 |
| 2.2.1 试验药品 |
| 2.2.2 试验仪器 |
| 2.3 试验方法 |
| 2.3.1 冷冻存活率的测定 |
| 2.3.2 相对电导率的测定 |
| 2.3.3 半致死温度的测定 |
| 2.3.4 活性氧含量的测定 |
| 2.3.5 保护酶活性的测定 |
| 2.3.6 抗氧化剂含量的测定 |
| 2.3.7 糖分含量的测定 |
| 2.3.8 糖酵解关键酶活性的测定 |
| 2.4 数据处理 |
| 3 结果与分析 |
| 3.1 低温处理下不同品种冬小麦存活率的变化 |
| 3.2 低温处理下不同品种冬小麦分蘖节相对电导率的变化 |
| 3.3 低温处理下不同品种冬小麦分蘖节超氧阴离子产生速率的变化 |
| 3.4 低温处理下不同品种冬小麦过氧化氢含量的变化 |
| 3.5 低温处理下不同品种冬小麦分蘖节保护酶活性的变化 |
| 3.5.1 超氧化物歧化酶(SOD)活性的变化 |
| 3.5.2 过氧化物酶(POD)活性的变化 |
| 3.5.3 过氧化氢酶(CAT)活性的变化 |
| 3.5.4 抗坏血酸过氧化物酶(APX)活性的变化 |
| 3.6 低温处理下不同品种冬小麦分蘖节非酶抗氧化物质的变化 |
| 3.6.1 ASA含量的变化 |
| 3.6.2 总ASA含量的变化 |
| 3.6.3 DHA含量的变化 |
| 3.6.4 ASA/DHA的变化 |
| 3.6.5 还原型谷胱甘肽(GSH)含量的变化 |
| 3.6.6 氧化型谷胱甘肽(GSSG)含量的变化 |
| 3.6.7 总GSH含量的变化 |
| 3.6.8 GSH/GSSG的变化 |
| 3.7 低温处理下不同品种冬小麦糖代谢的变化 |
| 3.7.1 可溶性糖含量的变化 |
| 3.7.2 蔗糖含量的变化 |
| 3.7.3 果糖含量的变化 |
| 3.7.4 蔗糖和果糖总和占可溶性糖的比例的变化 |
| 3.8 低温处理下不同品种冬小麦呼吸代谢相关酶活性的变化 |
| 3.8.1 丙酮酸激酶活性的变化 |
| 3.8.2 己糖激酶活性的变化 |
| 4 讨论 |
| 4.1 低温胁迫下不同冬小麦品种成活率和电导率与抗寒性的关系 |
| 4.2 低温胁迫下不同冬小麦品种活性氧水平和抗氧化酶活性与抗寒性的关系 |
| 4.3 低温胁迫下不同冬小麦品种抗氧化剂含量与抗寒性的关系 |
| 4.4 低温胁迫下不同冬小麦品种糖含量与抗寒性的关系 |
| 4.5 低温胁迫下不同冬小麦品种糖酵解关键酶活性与抗寒性的关系 |
| 5 结论 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 |
（3）两种连翘的抗寒性分析（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 1 引言 |
| 1.1 课题背景 |
| 1.2 植物抗寒研究现状 |
| 1.2.1 对抗寒性的认识 |
| 1.2.2 寒害发生的机理 |
| 1.2.3 林木抗寒性种类 |
| 1.2.4 植物抗寒性研究方法 |
| 1.2.5 生理生化指标与抗寒性 |
| 2 材料与方法 |
| 2.1 材料 |
| 2.1.1 自然越冬低温试验材料 |
| 2.1.2 人工低温胁迫试验材料 |
| 2.2 试验方法[129] |
| 2.2.1 超氧化物歧化酶(SOD)活性的测定 |
| 2.2.2 过氧化物酶的测定(POD) |
| 2.2.3 可溶性蛋白含量测定 |
| 2.2.4 MDA 两二酸的测定(MDA) |
| 2.2.5 相对电导率的测定 |
| 2.2.6 半致死温度的计算 |
| 2.2.7 抗寒性隶属函数分析 |
| 3 结果与分析 |
| 3.1 人工低温胁迫下两种连翘各生理指标的变化 |
| 3.1.1 低温胁迫对电解质渗出率的影响 |
| 3.1.2 低温胁迫下连翘枝条的半致死温度（LT50）分析 |
| 3.1.3 低温胁迫对超氧化物歧化酶（SOD）活性的影响 |
| 3.1.4 低温胁迫对可溶性蛋白含量的影响 |
| 3.1.5 低温胁迫对丙二醛（MDA）含量的影响 |
| 3.1.6 低温胁迫对过氧化物酶（POD）活性的变化 |
| 3.2 自然降温过程中两种连翘枝条各种生理指标的变化 |
| 3.2.1 自然降温过程中连翘细胞膜质膜透性的变化 |
| 3.2.2 自然降温过程中连翘超氧化物歧化酶（SOD）活性的变化 |
| 3.2.3 自然降温过程中连翘可溶性蛋白质含量的变化 |
| 3.2.4 自然降温过程中连翘枝条 MDA 含量的变化 |
| 3.2.5 自然降温过程中连翘枝条过氧化物酶(POD)活性的变化 |
| 3.3 连翘花器官的抗寒性 |
| 3.3.1 过冷却点温度的比较 |
| 3.3.2 低温处理后可溶性蛋白含量的变化 |
| 3.3.3 低温处理后 MDA 含量的变化 |
| 3.3.4 低温处理后过氧化物酶（POD）含量的变化 |
| 3.3.5 低温处理后超氧化物歧化酶（SOD）含量的变化 |
| 3.4 抗寒性综合分析 |
| 4 讨论 |
| 5 结论 |
| 参考文献 |
| 在读期间发表论文 |
| 作者简介 |
| 致谢 |
（4）拟南芥CBF1基因转化香蕉及其抗寒性研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 缩略词表 |
| 第一章 文献综述 |
| 1 植物的抗寒研究进展 |
| 1.1 植物低温伤害的机制 |
| 1.1.1 植物低温伤害的类型 |
| 1.1.2 低温引起植物损伤的主要原因 |
| 1.2 植物的抗寒生理生化研究 |
| 1.2.1 低温对光合作用的影响 |
| 1.2.2 对呼吸作用的影响 |
| 1.2.3 对原生质流动性的影响 |
| 1.2.4 对渗透调节物质的影响 |
| 1.2.5 对内源激素的影响 |
| 1.3 植物抗寒分子机理研究 |
| 1.3.1 低温感应器 |
| 1.3.2 植物的冷信号传导器 |
| 1.3.3 转录的级联反应 |
| 1.3.4 低温信号在抗寒和冷敏植物中的比较 |
| 1.3.5 低温胁迫与其他非生物胁迫的交叉 |
| 1.4 植物抗寒育种研究 |
| 1.4.1 杂交育种 |
| 1.4.2 诱变育种 |
| 1.4.3 分子育种 |
| 2 香蕉的转基因研究进展 |
| 2.1 受体材料的选择 |
| 2.2 转基因方法 |
| 2.2.1 粒子轰击法 |
| 2.2.2 农杆菌介导法 |
| 2.2.3 电击法 |
| 2.2.4 其他改进的方法 |
| 2.3 高效再生体系的建立 |
| 3 拟南芥CBF家族与植物抗冷冻性 |
| 3.1 拟南芥CBF基因家族 |
| 3.1.1 CBF基因的克隆 |
| 3.1.2 CBF基因的结构特征 |
| 3.1.3 CBF转录因子的表达调控特性 |
| 3.1.4 CBF基因抗逆作用机制 |
| 3.2 CBF转基因研究 |
| 3.2.1 粮食作物 |
| 3.2.2 经济作物和林木 |
| 3.2.3 园艺植物 |
| 3.2.4 草类植物 |
| 4 本研究的目的和意义 |
| 5 技术路线 |
| 第二章 夫人指蕉和大蕉胚性细胞悬浮系的建立及其植株再生 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 方法 |
| 1.2.1 外植体的选择与处理 |
| 1.2.2 愈伤组织的诱导、胚性愈伤组织的选择和继代培养 |
| 1.2.3 胚性悬浮诱导 |
| 1.2.4 体细胞胚的诱导和成熟 |
| 1.2.5 胚的萌发及生根 |
| 1.2.6 培养条件 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 胚性悬浮细胞的获得 |
| 2.2 胚性悬浮细胞途径植株再生体系的建立 |
| 3 讨论 |
| 4 小结 |
| 第三章 拟南芥CBF1基因对香蕉的转化 |
| 第一节 拟南芥CBF1基因对大蕉的转化 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 主要培养基配方 |
| 1.3 ATCBF1基因植物表达载体的构建 |
| 1.3.1 ATCBF1基因的克隆 |
| 1.3.2 植物表达载体P1301-CBF1的构建 |
| 1.3.3 P1301-CBF1质粒转化农杆菌 |
| 1.4 ATCBF1基因对大蕉的转化 |
| 1.4.1 侵染和共培养 |
| 1.4.2 抗性胚的筛选 |
| 1.4.3 抗性胚萌发与植株再生 |
| 1.5 转基因植株的验证 |
| 1.5.1 GUS染色鉴定 |
| 1.5.2 PCR鉴定 |
| 1.5.3 RT-PCR鉴定 |
| 1.5.4 QRT-PCR鉴定 |
| 1.6 转基因植株的形态特征观测 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 A7CBF1基因的克隆 |
| 2.2 ATCBF1基因植物表达载体的构建 |
| 2.3 转ATCBF1基因大蕉植株的获得及GUS染色鉴定 |
| 2.5 外源基因ATCBF1的表达分析 |
| 2.5.1 RT-PCR的检测结果 |
| 2.5.2 QRT-PCR的检测结果 |
| 2.6 转基因大蕉的形态观测 |
| 3 讨论 |
| 第二节 拟南芥CBF1基因对夫人指蕉的转化 |
| 1 材料与方法 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 ATCBF1基因的克隆及其植物表达载体的构建 |
| 2.2 转基因植株的转化、筛选、再生和GUS染色 |
| 2.3 PCR检测 |
| 2.4 ATCBF1基因的表达分析 |
| 2.4.1 RT-PCR检测 |
| 2.4.2 定量RT-PCR检测 |
| 2.5 转基因植株的形态观测 |
| 3 讨论 |
| 4 小结 |
| 第四章 转ATCBF1基因香蕉的抗寒性检测 |
| 第一节 转基因大蕉的抗寒性检测 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 低温处理方法 |
| 1.3 抗寒生理生化指标的测定 |
| 1.3.1 离子渗漏率的测定 |
| 1.3.2 丙二醛(MDA)的测定 |
| 1.3.3 SOD酶活性测定 |
| 1.3.4 脯氨酸含量的测定 |
| 1.3.5 可溶性糖的测定 |
| 1.3.6 相对含水量的测定 |
| 1.4 数据分析 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 离子渗漏率的测定 |
| 2.2 丙二醛(MDA)含量的测定 |
| 2.3 超氧化物歧化酶(SOD)的总活性测定 |
| 2.4 游离脯氨酸含量测定 |
| 2.5 可容性多糖测定 |
| 2.6 相对含水量的测定 |
| 2.7 转基因大蕉植株的抗冷性检测 |
| 3 讨论 |
| 第二节 转基因夫人指蕉的抗寒性检测 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 低温处理方法 |
| 1.3 抗寒生理生化指标的测定 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 离子渗漏率的测定 |
| 2.2 MDA的测定 |
| 2.3 游离脯氨酸的测定 |
| 2.4 可溶性糖的测定 |
| 2.5 相对含水量的测定 |
| 2.6 转基因夫人指蕉的抗冷性检测 |
| 3 小结 |
| 第五章 转ATCBF1基因大蕉抗寒基因的克隆 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 试验材料 |
| 1.2 试验方法 |
| 1.2.1 总RNA抽提 |
| 1.3 抑制性差减杂交 |
| 1.3.1 第一链cDNA的合成 |
| 1.3.2 双链cDNA(DS cDNA)的合成 |
| 1.3.3 Ds cDNA RSAⅠ酶消化 |
| 1.3.4 RASⅠ酶切产物的纯化 |
| 1.3.5 接头连接 |
| 1.3.6 消减杂交 |
| 1.3.7 PCR扩增 |
| 1.3.8 PCR产物纯化 |
| 1.3.9 克隆转化 |
| 1.3.10 阳性克隆测序 |
| 1.3.11 生物信息学分析 |
| 1.3.12 基因的表达分析 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 总RNA的提取 |
| 2.2 Ds DNA的纯化 |
| 2.3 Ds cDNA合成及其RSAⅠ酶切消化 |
| 2.4 抑制性PCR扩增结果 |
| 2.5 阳性克隆的检测 |
| 2.6 序列对比结果 |
| 2.7 CLP基因的表达分析 |
| 3 讨论 |
| 4 小结 |
| 结论 |
| 论文创新点 |
| 下一步工作设想 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
（5）不同草莓品种抗寒性的综合评价（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Summary |
| 缩略词表 |
| 目录 |
| 图表索引 |
| 1. 文献综述 |
| 1.1 冷害机理 |
| 1.1.1 "膜相变"假说 |
| 1.1.2 活性氧的破坏作用 |
| 1.1.3 钙离子是"感应体"和"引发物" |
| 1.2 冻害机理 |
| 1.3 植物抗寒性的测定方法 |
| 1.4 植物生理生化指标与抗寒性的关系 |
| 1.4.1 细胞膜透性与植物抗寒性的关系 |
| 1.4.2 膜脂、丙二醛与植物抗寒性的关系 |
| 1.4.3 保护性酶与植物抗寒性的关系 |
| 1.4.4 渗透调节物质与植物抗寒性的关系 |
| 1.4.4.1 含水量与植物抗寒性的关系 |
| 1.4.4.2 可溶性糖与植物抗寒性的关系 |
| 1.4.4.3 脯氨酸与植物抗寒性的关系 |
| 1.4.4.4 可溶性蛋白质与植物抗寒性的关系 |
| 1.5 植物抗寒性综合评价分析 |
| 1.6 研究的目的及意义 |
| 2. 材料与方法 |
| 2.1 材料 |
| 2.2 方法 |
| 2.2.1 试验设计及取样 |
| 2.2.2 测定项目及方法 |
| 2.2.2.1 细胞膜透性的测定 |
| 2.2.2.2 丙二醛含量的测定 |
| 2.2.2.3 叶片含水量的测定 |
| 2.2.2.4 光合色素含量的测定 |
| 2.2.2.5 可溶性糖含量的测定 |
| 2.2.2.6 可溶性蛋白含量的测定 |
| 2.2.2.7 脯氨酸含量的测定 |
| 2.2.2.8 超氧化物歧化酶活性的测定 |
| 2.2.2.9 过氧化物酶活性的测定 |
| 2.2.2.10 半致温度的测定 |
| 2.2.2.11 草莓抗寒性的综合评价分析 |
| 2.3 数据处理 |
| 3. 结果与分析 |
| 3.1 试验期间气温变化趋势 |
| 3.2 不同草莓品种的半致死温度的比较 |
| 3.3 自然降温对草莓叶片绝对含水量的影响 |
| 3.4 自然降温对草莓叶片相对含水量的影响 |
| 3.5 自然降温对草莓叶片膜透性的影响 |
| 3.6 自然降温对草莓叶片丙二醛含量的影响 |
| 3.7 自然降温对草莓叶片叶绿素含量的影响 |
| 3.8 自然降温对草莓叶片可溶性糖含量的影响 |
| 3.9 自然降温对草莓叶片可溶性蛋白质含量的影响 |
| 3.10 自然降温对草莓叶片脯氨酸含量的影响 |
| 3.11 自然降温对草莓叶片超氧化物岐化酶活性的影响 |
| 3.12 自然降温对草莓叶片氧化物酶活性的影响 |
| 3.13 草莓抗寒性的综合评价分析 |
| 3.14 草莓抗寒性聚类分析 |
| 4. 讨论 |
| 4.1 不同草莓品种的半致死温度 |
| 4.2 自然降温对草莓叶片含水量的影响 |
| 4.3 自然降温对草莓叶片膜系统的影响 |
| 4.4 自然降温对草莓叶片渗透调节物质的影响 |
| 4.5 自然降温对草莓叶片保护性酶的影响 |
| 4.6 草莓抗寒性的综合评价分析与聚类分析 |
| 5. 结论 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简介 |
| 导师简介 |
（6）植物冻害和氧化胁迫——甘蓝叶冻-融循环中超氧的产生（论文提纲范文）
| 1 引 言 |
| 2 材料与方法 |
| 2.1 植物材料 |
| 2.2 冰冻试验 |
| 2.3 氧化胁迫测定 |
| 2.4 叶组织耐冻性和冻融循环中氧化胁迫测定 |
| 2.5 干扰实验 |
| 3 结果与分析 |
| 3.1 NBT还原和冻害的相关性 |
| 3.2 Me2SO在防止冻害和抑制NBT还原上的作用 |
| 3.3 NADPH对冻害和NBT还原的影响 |
| 3.4 抗坏血酸还原NBT的可能性 |
| 4 讨 论 |
| 4.1 NBT还原可作为植物冻-融循环中氧化胁迫的定量指标 |
| 4.2 NBT还原指示着O2-.的产生 |
| 4.3 Me2SO的冻害防御作用和防止O2-.产生有关 |
| 4.4 NBT还原法的局限性 |
四、植物冻害和氧化胁迫——甘蓝叶冻-融循环中超氧的产生（论文参考文献）
- [1]巴西橡胶树中2个NADP-苹果酸酶基因的克隆和表达特性分析[J]. 曹冰,龙翔宇,肖小虎,唐朝荣. 热带作物学报, 2014(05)
- [2]低温条件下冬小麦糖代谢和抗氧化活性与耐寒性关系[D]. 陈超. 东北农业大学, 2014(01)
- [3]两种连翘的抗寒性分析[D]. 回彦哲. 河北农业大学, 2013(03)
- [4]拟南芥CBF1基因转化香蕉及其抗寒性研究[D]. 刘凯. 湖南农业大学, 2012(11)
- [5]不同草莓品种抗寒性的综合评价[D]. 杨凤翔. 甘肃农业大学, 2010(02)
- [6]植物冻害和氧化胁迫——甘蓝叶冻-融循环中超氧的产生[J]. 靳月华,陶大立,杜英君. 应用生态学报, 2002(12)